電泳技術(shù)臨床應(yīng)用

電泳技術(shù)臨床應(yīng)用:隨著新的電泳技術(shù)的出現(xiàn)，各種自動(dòng)化電泳分析儀問(wèn)世并相繼被引入臨床實(shí)驗(yàn)室，電泳技術(shù)在臨床疾病的診斷中正發(fā)揮越來(lái)越多的作用，特別是為各種體液蛋白質(zhì)、同工酶等的檢測(cè)提供了新的手段。1. 血清蛋白電泳　新鮮血清經(jīng)醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳，染色后，常見(jiàn)白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。血清蛋白質(zhì)電冰圖譜是了解患者血清蛋白質(zhì)全貌的有價(jià)值的方法，可用為初篩試驗(yàn)隨著新的電泳技術(shù)的出現(xiàn)，各種自動(dòng)化電泳分析儀問(wèn)世并相繼被引入臨床實(shí)驗(yàn)室，電泳技術(shù)在臨床疾病的診斷中正發(fā)揮越來(lái)越多的作用，特別是為各種體液蛋白質(zhì)、同工酶等的檢測(cè)提供了新的手段。
1. 血清蛋白電泳　新鮮血清經(jīng)醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳，染色后，常見(jiàn)白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。血清蛋白質(zhì)電冰圖譜是了解患者血清蛋白質(zhì)全貌的有價(jià)值的方法，可用為初篩試驗(yàn)。急性炎癥或急性時(shí)相反應(yīng)時(shí)常以α1、α2 區(qū)帶加深為特征；妊娠型α1 區(qū)帶增高，伴有β區(qū)帶增高；腎病綜合征、慢性腎小球腎炎時(shí)呈現(xiàn)白蛋白下降，α1、β球蛋白升高；缺鐵性貧血時(shí)可由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的升高而呈現(xiàn)β區(qū)帶增高，而慢性肝病或肝硬化呈現(xiàn)白蛋白顯著降低；γ球蛋白升高2～3倍，顯示免疫球蛋白( Ig)多克隆高，甚至可見(jiàn)β～γ橋，還可在γ區(qū)呈現(xiàn)細(xì)而密的寡克隆區(qū)帶；單克隆Ig異常癥(M蛋白血癥)則在電冰區(qū)帶α～γ區(qū)呈現(xiàn)致密而深染，高度集中的蛋白克隆增生區(qū)帶(M蛋白區(qū)帶) 。
2. 尿蛋白電泳　尿蛋白電泳的主要目的是在無(wú)損傷的情況下，協(xié)助臨床判斷腎臟病變的嚴(yán)重程度。當(dāng)不能進(jìn)行腎活檢時(shí)，尿蛋白電泳結(jié)果能很好地協(xié)助臨床判斷腎臟的主要損害。尿蛋白電泳后呈現(xiàn)出中、高分子蛋白區(qū)帶主要反映腎小球病變，呈現(xiàn)出低分子蛋白區(qū)帶可見(jiàn)于腎小管病變或溢出性蛋白尿(如本周蛋白) ；混合性蛋白尿可見(jiàn)到各種分子量區(qū)帶，示腎小球和腎小管均受累及。對(duì)臨床癥狀不典型的患者及微量蛋白尿患者的診斷及各種腎臟疾病治療過(guò)程中病情的動(dòng)態(tài)分析也具有很大價(jià)值。
3. 腦脊液蛋白電泳　若在腦脊液(CSF)標(biāo)本中檢出寡克隆區(qū)帶，而其相應(yīng)血標(biāo)本中未能檢出區(qū)帶，反映是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)本身合成的Ig，具有重要臨床意義。但為保證正確的比較與藥學(xué)招聘分析，須將患者血清和CSF在同一天同步進(jìn)行分析，以論證不同來(lái)源的Ig。中樞合成Ig是中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患的一個(gè)重要信號(hào)，主要用于多發(fā)性硬化癥、癡呆、脊髓炎、亞急性腦白質(zhì)炎、神經(jīng)性梅毒等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患的診斷和鑒別診斷。
4. 血紅蛋白及糖化血紅蛋白電泳　應(yīng)用電泳法鑒別患者血液中Hb的類(lèi)型及含量對(duì)于貧血類(lèi)型的臨床診斷及治療具有重大意義。HbA2 增高是β2輕型地中海貧血的一個(gè)重要特征，HbA2 減低見(jiàn)于缺鐵性貧血及其他Hb合成障礙性疾病(常見(jiàn)如α2地中海貧血) 。電泳發(fā)現(xiàn)異常Hb如HbC、HbD、HbE、HbK和HbS等則可診斷為相應(yīng)的Hb分子病。在酸性條件下電泳，可將糖化血紅蛋白的不同組分HbA1 a,，HbA1 b和HbA1 c分離開(kāi)來(lái)，HbA1 c形成與RBC內(nèi)葡萄糖有關(guān)，可特異性反映測(cè)定前6~8周體內(nèi)葡萄糖水平。此外，糖化血紅蛋白可對(duì)某些患者因HbF增高所造成HbA1 c假性升高作出解釋。
5. 免疫固定電泳　可對(duì)各類(lèi)Ig及其輕鏈進(jìn)行分型，最常用于臨床常規(guī)M蛋白的分型與鑒定。一般用于單克隆Ig增殖病、單克隆Ig病、本周蛋白和游離輕鏈病、多組分單克隆Ig病、重鏈病、CSF寡克隆蛋白鑒別、多克隆Ig病的診斷和鑒別診斷。
6. 同工酶電泳　臨床上用于同工酶或同工酶亞型分析。
(1)乳酸脫氫酶(LD /LDH)同工酶　用瓊脂糖凝膠電泳(AGE)法可分離出5種同工酶區(qū)帶(LD1 ～LD5 ) 。主要用于急性心肌梗死(LD1 >LD2 )及骨骼肌疾病(LD5 升高)的診斷和鑒別診斷。惡性腫瘤、肝硬化時(shí)可見(jiàn)LD5 明顯升高，或在胸腹水中出現(xiàn)一條異常LD6區(qū)帶。
(2)肌酸激酶(CK)同工酶　采用AGE法可分離出3種CK同工酶。當(dāng)出現(xiàn)異常同工酶如巨肌酸激酶1 (CK1 ) 、巨CK2 等時(shí)，從電泳圖譜上很容易發(fā)現(xiàn)。CK2MB在心肌梗死早期增加和短時(shí)間內(nèi)達(dá)峰值也是心肌再灌注的指征。CK2BB增高見(jiàn)于腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤、小細(xì)胞肺癌和胃腸道惡性腫瘤，后者還常有CK2Mt增高。
(3) CK同工酶亞型　指CK2MM亞型(CK2MM1、CK2MM2、CK2MM3 )和CK2MB亞型(CK2MB1、CK2MB2 ) ，常采用瓊脂糖凝膠IEF或高壓電泳。采用瓊脂糖凝膠高壓電泳可進(jìn)行CK同工酶亞型的常規(guī)快速分析，用于臨床早期心肌損傷的臨床診斷與鑒別診斷。主要用于急性心肌梗死的早期診斷，也可用于確定心肌再灌注、溶栓治療后的病情觀察。
(4)堿性磷酸酶(ALP)同工酶　可采用AGE法進(jìn)行ALP同工酶的常規(guī)快速分析。肝外阻塞性黃疸、轉(zhuǎn)移性肝癌、肝膿瘍和膽石癥時(shí)膽汁ALP檢出率很高，并伴有肝ALP增加，而肝內(nèi)膽汁淤積、急性肝炎、原發(fā)性肝癌等主要表現(xiàn)為肝ALP增多，大多數(shù)不出現(xiàn)膽汁ALP。甲亢、惡性骨損傷、佝僂病、骨折、肢端肥大癥所致骨損傷等，均引起骨ALP同工酶增加。骨ALP、高分子ALP同工酶對(duì)惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移或肝轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性預(yù)示值較總ALP高。胃腸道腫瘤、肺癌等惡性腫瘤時(shí)出現(xiàn)類(lèi)腸型ALP。