 |
 |
據(jù)統(tǒng)計，約有80%以上的腫瘤病人死于腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移，其過程雖很復(fù)雜，但其基本步驟包括壓力作用、癌組織粘附性降低、癌細(xì)胞遷移、細(xì)胞粘附分子作用和細(xì)胞外基質(zhì)降解�；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP能有效降解細(xì)胞外基質(zhì)，在腫瘤生長、轉(zhuǎn)移過程中均起著重要作用。MMP_7是MMP家族中最小的成員，可降解各種細(xì)胞外基質(zhì)成分。為研究胃癌發(fā)生浸潤、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，本研究應(yīng)用免疫組化檢測胃癌組織中MMP_7和其組織抑制因子_1(TIMP_1的表達(dá)，探討其在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2004_01—2006_12汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院有完整資料的原發(fā)性胃癌手術(shù)切除標(biāo)本的存檔蠟塊36例(男性32例，女性4例。年齡44～81歲，平均60.2歲。所有患者術(shù)前均未接受放、化療，并進(jìn)行隨訪。病理組織分型：標(biāo)本經(jīng)病理證實為腺癌，其中低分化腺癌11例,高、中分化腺癌25例。采用國際抗癌聯(lián)盟1987年公布的胃癌TNM分期：Ⅰ期2例，Ⅱ期8例，Ⅲ期20例，Ⅳ期6例。其中有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分別為24和12例。
1.2 檢測方法
手術(shù)標(biāo)本常規(guī)福爾馬林固定，24h內(nèi)取材，石蠟包埋，連續(xù)切片(厚4μm，蘇木精_伊紅染色。MMP_7和TIMP_1免疫組化染色。本實驗采用鏈霉素_生物素(S_P免疫組化技術(shù),MMP_7和TIMP_1單克隆抗體及免疫組化試劑盒(福州邁新生物技術(shù)公司，中國。按說明書操作。用已知的乳腺癌陽性片作陽性對照，同時用PBS替代一抗作陰性對照。根據(jù)細(xì)胞膜或胞漿的染色程度及染色細(xì)胞百分率進(jìn)行判定：細(xì)胞膜或胞漿中有棕黃色顆粒沉著為陽性�；静恢蛑�(xì)胞占計數(shù)細(xì)胞<5%為“_”，著色淡或著色細(xì)胞占5%～25%為“+”，著色深或著色細(xì)胞占26%～50%為“++”，著色細(xì)胞計數(shù)>50%為“+++”醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站52667788.cn。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
各樣本計數(shù)資料采用SPSS10.0軟件包統(tǒng)計處理，組間計數(shù)資料差異比較采用χ2檢驗。
2 結(jié)果
MMP_7在胃癌組織中的陽性表達(dá)率(58.3%(21/36顯著高于癌旁組織(5.6%(2/36(P<0.01;TIMP_1在胃癌組織中的陽性表達(dá)率(44.4%(16/36低于癌旁組織(50.0%(18/36，但無統(tǒng)計學(xué)意義(表1。MMP_7在胃癌組織中的表達(dá)呈細(xì)胞膜分布，陽性信號為棕黃色顆粒(圖1，封3，MMP_7在癌旁組織中呈陰性表達(dá)，少部分為弱陽性，染色較淺(圖2，封3。TIMP_1在胃癌組織及癌旁組織中的表達(dá)呈細(xì)胞膜分布，陽性信號為棕黃色顆粒(圖3、4，封3。MMP_7的陽性表達(dá)與胃癌TNM分期(P<0.01及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P<0.05均顯著相關(guān)。但與腫瘤大小、部位、脈管侵犯、分化程度、浸潤深度等無相關(guān)。MMP_7在Ⅰ、Ⅱ期及Ⅲ、Ⅳ期的陽性表達(dá)率分別為20.0%和73.1%，分期越晚，表達(dá)越強(qiáng)。MMP_7在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性表達(dá)率分別為70.8%和33.3%，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多，表達(dá)越強(qiáng);TIMP_1的陽性表達(dá)與胃癌TNM分期顯著相關(guān)(P<0.05。但與腫瘤大小、部位、脈管侵犯、分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等無相關(guān)。TIMP_1在Ⅰ、Ⅱ期及Ⅲ、Ⅳ期的陽性表達(dá)率分別為80.0%和30.8%，分期越早，表達(dá)越強(qiáng)(表2。 表1 胃癌及癌旁組織中MMP_7和TIMP_1的表達(dá)表2 MMP_7和TIMP_1的表達(dá)與相關(guān)因素
