方法名稱: |
辣椒及其制品—蘇丹紅色素—HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于辣椒及其制品中蘇丹紅色素含量的測(cè)定 |
方法原理: |
本品加乙腈振蕩提取,經(jīng)液相色譜分離,在500 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 Waters 600S高效液相色譜儀(配有PDA檢測(cè)器),Quattro Ultima TM Pt液質(zhì)譜聯(lián)用儀(配有Waters 2695 Separation Module,Waters 2996 PDA) 色譜條件 色譜柱:Agilent ODS-C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:溶劑A:酸性水溶液(165mL 乙酸溶于1000 mL水中),溶劑B:乙腈,梯度洗脫:0~20 min,A=30~5 %,B=70~95 %;20~30 min,A=5~0 %,B=95~100 %;30~42 min,A=0 %,B=100 %;流速:0.7 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):500 nm;進(jìn)樣量:10 μL |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液制備 準(zhǔn)確稱取50.0 mg著色劑,并按不同方式移入100 mL容量瓶定容。 供試品溶液制備 先將采樣放入一個(gè)容量較大的密閉容器中混合均勻,對(duì)于固體樣品要用勻漿機(jī)或粉碎機(jī)磨細(xì)。之后準(zhǔn)確稱取樣品2.000 g于50 mL聚四氟乙烯離心管中,用60 mL乙腈分3次加入樣品中,每次振蕩提取30 min,4000 rpm離心,合并上清液,過濾后,減壓濃縮至干。再用10 mL二氯甲烷溶解,超聲2 min后,減壓濃縮至干,用3 mL乙腈分3次洗入刻度離心管中,過0.45 μm濾膜后,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取蘇丹紅色素對(duì)照液以及辣椒供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算蘇丹紅色素含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
李軍,雍煒,李剛等.HPLC法測(cè)定辣椒及其制品中蘇丹紅色素含量.檢驗(yàn)檢疫科學(xué). 2005.15(2): 43~45 |