自擬
中草藥復(fù)方治療仔豬黃痢的試驗(yàn)
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本試驗(yàn)通過病原菌體外藥物敏感試驗(yàn)、人工致病治療試驗(yàn)探討治療仔豬黃痢的有效、安全的中草藥復(fù)方。1材料:1.1試驗(yàn)儀器:高壓滅菌器,生化培養(yǎng)箱,超凈工作臺(tái),顯微鏡,冰箱,離心機(jī),常用玻璃器材等。 1.2試驗(yàn)藥物:(1)自擬中草藥復(fù)方:
白頭翁50g,
黃柏40g,
秦皮30g,
黃連30g,
黃芪30g,
當(dāng)歸30g,板栗雄花絮50g。(2)
黃連解毒湯:黃連30g、
黃芩40g、黃柏20g、
梔子40g。各味中草藥均購(gòu)于臨沂市中草藥批發(fā)市場(chǎng)。(3)
環(huán)丙沙星,由山東齊魯獸藥廠生產(chǎn)。1.3藥敏紙片 (1)西藥藥敏紙片。
青霉素、
四環(huán)素、
鏈霉素、
紅霉素、
慶大霉素、卡那霉素、環(huán)丙沙星、復(fù)方磺胺、先鋒霉素Ⅴ、
氯霉素、氟哌酸、
呋喃妥因、氨芐青霉素、羧芐青霉素、痢特靈,由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)提供(批號(hào)060815)。(2)自擬中藥復(fù)方藥敏紙片和黃連解毒湯藥敏紙片。由本課題組參照文獻(xiàn)介紹的方法自制。1.4試驗(yàn)菌株及菌液:為本課題組分離的地方優(yōu)勢(shì)型菌株,血清型為 O54。取37 ℃ 16~18 h普通肉湯培養(yǎng)物,用普通肉湯稀釋為每毫升5億個(gè)菌,于4℃冰箱保存?zhèn)溆。?.5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:3日齡仔豬(杜長(zhǎng)大)共計(jì)72頭,由我院實(shí)習(xí)基地提供。 2方法:(1)病原菌體外藥敏試驗(yàn):用消毒棉拭子將試驗(yàn)用菌液均勻涂布在普通瓊脂培養(yǎng)基平板上,將抗生素藥敏紙片和中藥藥敏紙片分別貼在培養(yǎng)基表面,置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h,用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑。(2)判定試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為:抑菌圈直徑小于10mm為耐藥;10~15 mm為中度敏感;15 mm以上為高度敏感。(3)人工致病治療試驗(yàn):①分組及人工感染。選取6窩3日齡仔豬(母豬未免疫大腸桿菌疫苗),每窩保留12頭仔豬,分別記為Ⅰ~Ⅵ組。在每一窩中每2頭一組,隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F 6個(gè)小組,然后再將它們分別分配到Ⅰ~Ⅵ組,每組12頭仔豬。分配到的仔豬體表涂上新母豬的糞尿。6個(gè)試驗(yàn)組中,其中Ⅰ組為空白對(duì)照組,Ⅱ組為陽(yáng)性對(duì)照組,Ⅲ組為西藥組,Ⅳ組為自擬中藥組,Ⅴ組為中西醫(yī)結(jié)合組,Ⅵ組為黃連解毒湯組。Ⅰ組每頭實(shí)驗(yàn)仔豬口服生理鹽水0.3 mL,其余各組每只口服試驗(yàn)大腸桿菌菌液0.3 mL;②治療。人工感染10 h后各組相繼發(fā)病,各組按預(yù)先設(shè)計(jì)劑量及途徑給藥,Ⅰ、Ⅱ組均不給藥;Ⅲ組發(fā)病仔豬肌肉注射本試驗(yàn)菌株的高敏藥物環(huán)丙沙星(5 mg/kg);Ⅳ組將上述自擬方劑的各中藥混合共研細(xì)末,哺乳母豬拌料喂服(上述方藥為1頭母豬服用量),1日1劑,連用3劑,同時(shí)取上述方劑的中藥煎水,灌服發(fā)病仔豬(上述方藥為10頭仔豬的灌服量),每日兩次,連用3 d;Ⅴ組同時(shí)采、蠼M和Ⅳ組措施;Ⅵ組使用黃連解毒湯,方法同Ⅳ組;③試驗(yàn)期間試驗(yàn)組與對(duì)照組采取相同的飼養(yǎng)管理措施。搞好衛(wèi)生:及時(shí)清掃糞尿、更換墊草,保持舍內(nèi)干燥,解決好保溫與通風(fēng)的問題。加強(qiáng)消毒:加強(qiáng)環(huán)境消毒,舍內(nèi)用2%百毒殺每日進(jìn)行1次帶豬消毒。每次哺乳前將母豬的乳房、乳頭、腹部等體表用1%
高錳酸鉀水浸泡的毛巾擦洗消毒;④療效判定。治愈:下痢消失,糞便形狀、顏色、排糞次數(shù)恢復(fù)正常,精神、食欲恢復(fù)正常。有效:下痢減輕,糞便有好轉(zhuǎn),精神、食欲尚未完全好轉(zhuǎn)。無效:下痢癥狀無好轉(zhuǎn)或加重,食欲、精神狀況無明顯改變,病仔豬甚至死亡。數(shù)據(jù)的顯著性檢測(cè),發(fā)病率、有效率及治愈率均用卡方檢驗(yàn)。3結(jié)果與分析:(1)體外藥敏試驗(yàn):體外藥敏試驗(yàn)表明,治療本大腸桿菌病的高度敏感藥物有環(huán)丙沙星、卡那霉素和痢特靈,中度敏感藥物有羧芐青霉素、氯霉素、慶〖JP2〗大霉素和呋喃妥因,對(duì)其他藥物均不敏感。自擬中藥紙片抑菌圈直徑為13.7 mm,屬中度敏感藥物。黃連解毒湯抑菌圈直徑為12.7 mm,屬中度敏感藥物。 (2)人工致病治療試驗(yàn) 由表1可知,Ⅳ組(自擬中藥組)與Ⅰ組(空白對(duì)照組)、Ⅱ(陽(yáng)性對(duì)照組)、Ⅵ組(黃連解毒湯組)相比差異顯著(P<0.05),與Ⅲ組(環(huán)丙沙星組)差異不顯著(P>0.05);說明本自擬中草藥復(fù)方具有較好的治療仔豬黃痢效果,優(yōu)于黃連解毒湯,與高敏抗生素相當(dāng)。Ⅴ組(環(huán)丙沙星+自擬中藥)的治療效果最好,與其他組均差異顯著(P<0.05),說明中西醫(yī)結(jié)合治療的效果較好。表1人工致病治療試驗(yàn)結(jié)果:組別 實(shí)驗(yàn)仔豬數(shù) 治愈數(shù) 治愈率(%) 死亡數(shù) 死亡率(%)Ⅰ(空白對(duì)照組) 12 12 - 0 0Ⅱ(陽(yáng)性對(duì)照組) 12 1 - 11 91.7aⅢ(環(huán)丙沙星組) 12 10 83.3a 2 16.7bⅣ(自擬中藥組) 12 10 83.3a 2 16.7bⅤ(環(huán)丙沙星+自擬中藥) 12 11 91.2b 1 8.3cⅥ(黃連解毒湯組) 12 7 58.3c 5 41.7d注:同一系列標(biāo)相同字母表示差異不顯著,標(biāo)不同字母表示差異顯著,*表示存活數(shù)。
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