第十九章 衣原體
衣原體(Chlamydia)是一類(lèi)嚴(yán)格在真核細(xì)胞內(nèi)寄生,有獨(dú)特發(fā)育周期,能通過(guò)細(xì)菌濾器的原核細(xì)胞型微生物。過(guò)去曾被認(rèn)為是病毒,現(xiàn)歸屬于廣義細(xì)菌中的一類(lèi)微生物。
根據(jù)衣原體的抗原結(jié)構(gòu)和DNA同源性的特點(diǎn),將衣原體屬(Chlamydiae)分為四個(gè)種,包括沙眼衣原體(Chlamydiatrachomatis)、肺炎衣原體(Chlamydiapneumoniae)、鸚鵡熱衣原體(Chlamydiapsittaci)和獸類(lèi)衣原體(Chlamydiapecorum),彼此間的基本性狀有差異。
衣原體廣泛寄生于人類(lèi)、哺乳動(dòng)物及禽類(lèi),僅少數(shù)能致病,能引起人類(lèi)疾病的衣原體主要有沙眼衣原體、肺炎衣原體和鸚鵡熱衣原體。目前在發(fā)達(dá)國(guó)家中,由衣原體感染所致的性傳播疾病增加很快,生殖道感染的發(fā)病率已超過(guò)淋病奈瑟菌感染,成為最常見(jiàn)的性傳播疾病。
衣原體的共同特征是:①為小的(介于細(xì)菌與病毒之間)專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生微生物、革蘭染色陰性,球形或橢圓形體;②具有細(xì)胞壁,其組成與革蘭陰性菌相似;③衣原體在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖,具有獨(dú)特的發(fā)育周期。可觀察到兩種不同的顆粒結(jié)構(gòu):一種是小而致密,稱(chēng)為原體(elementarybody,EB),主要存在于細(xì)胞外,具有感染性;另一種是大而疏松,稱(chēng)為始體(initialbody),也稱(chēng)為網(wǎng)狀體(reticulatebody,RB),主要存在于細(xì)胞內(nèi),不具有感染性,但具有繁殖能力,以二分裂方式繁殖;④含有DNA和RAN兩類(lèi)核酸;⑤有核糖體和較復(fù)雜的酶類(lèi),能進(jìn)行多種代謝。但缺乏供代謝所需的能量來(lái)源,必須利用宿主細(xì)胞的三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量來(lái)源;⑥對(duì)多種抗生素敏感。
第一節(jié) 沙眼衣原體
沙眼衣原體是1956年由我國(guó)的微生物學(xué)家湯飛凡在世界上首次分離出來(lái)的,他采用的雞胚卵黃囊接種法被廣泛采用,后來(lái)許多類(lèi)似的病原被分離出來(lái),一類(lèi)介于細(xì)菌與病毒之間的特殊微生物——衣原體陸續(xù)被發(fā)現(xiàn),他是迄今為止發(fā)現(xiàn)重要病原體, 并開(kāi)辟了一個(gè)研究領(lǐng)域的唯一的中國(guó)微生物學(xué)家。
根據(jù)致病力和某些生物學(xué)性狀不同,沙眼衣原體可分為3個(gè)亞種:沙眼生物亞種(Biovar trachoma),性病淋巴肉芽腫亞種(Biovar LGV)和鼠亞種(Biovar mouse),不同生物亞種的易感組織細(xì)胞有區(qū)別,因此,決定它們所致的疾病不一樣。
采用微量免疫熒光法(MIF)可將沙眼衣原體至少分為18個(gè)血清型,其中沙眼生物亞種包括A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J和K共計(jì)14個(gè)血清型,LGV生物亞種包括L1、L2、L2a、L34個(gè)血清型。此外,目前還采用編碼MOMP的結(jié)構(gòu)基因OmpI寡核苷酸測(cè)序、OmpI限切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)等方法分型。
一、生物學(xué)性狀
形態(tài)染色 沙眼衣原體呈球形、橢圓形或梨形、直徑0.2~0.4μm, Giemsa染色呈紫紅色,普通光學(xué)顯微鏡下勉強(qiáng)可見(jiàn)。
發(fā)育周期 沙眼衣原體嚴(yán)格在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖,具有特殊的發(fā)育周期。可觀察到兩種不同的顆粒結(jié)構(gòu):一種是小而致密,稱(chēng)為原體(elementarybody,EB),在宿主細(xì)胞外較為穩(wěn)定,原體具有高度感染性,無(wú)繁殖能力,電鏡下中央有致密的類(lèi)核結(jié)構(gòu),有胞壁,是發(fā)育成熟的衣原體,當(dāng)原體進(jìn)入宿主易感細(xì)胞后,細(xì)胞膜圍于原體外形成空泡。原體在空泡中逐漸發(fā)育、增大成為始體,始體大而疏松,呈網(wǎng)狀,故也稱(chēng)為網(wǎng)狀體(reticulatebody,RB)。始體呈圓形或橢圓形,體積較大,電子致密度較低,無(wú)胞壁,代謝活潑,以二分裂方式繁殖,在空泡內(nèi)發(fā)育成許多子代原體。最后,成熟的子代原體從破壞的感染細(xì)胞中釋出;再感染新的易感細(xì)胞,開(kāi)始新的發(fā)育周期。每個(gè)發(fā)育周期約為48~72h(圖19-1)。始體是衣原體發(fā)育周期中的繁殖型,不具感染性。
原體和始體的主要區(qū)別見(jiàn)表19-3(P250)
包涵體系指在易感細(xì)胞內(nèi)含繁殖的始體和子代原體的空泡。由于發(fā)育時(shí)期不同,包涵體的形態(tài)和大小都有差別。成熟的包涵體含大量的原體。
培養(yǎng)特性 衣原體營(yíng)專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)寄生。沙眼衣原體能在6~8d齡雞胚或鴨胚卵黃囊中生長(zhǎng)繁殖,并可在卵黃囊膜內(nèi)找到包涵體、原體和始體顆粒。
沙眼衣原體還可在某些原代或傳代細(xì)胞株中生長(zhǎng),如HeLa-299、BHK-21、McCoy或HL細(xì)胞株,比雞胚培養(yǎng)更敏感。為提高分離培養(yǎng)陽(yáng)性率,可將接種標(biāo)本的細(xì)胞離心,增加衣原體與傳代細(xì)胞接觸的機(jī)會(huì),促進(jìn)衣原體進(jìn)入細(xì)胞;或先用X線(xiàn)照射細(xì)胞,使處于非分裂狀態(tài),抑制宿主細(xì)胞的增值,以提高其對(duì)衣原體的易感性。
抗原結(jié)構(gòu) 根據(jù)沙眼衣原體細(xì)胞壁的不同成份,可分為屬、種、型特異抗原。
1.屬特異抗原 是衣原體屬中4種不同衣原體所具有的一種共同抗原,位于胞壁,為脂多糖,類(lèi)似革蘭陰性菌的脂蛋白-脂多糖復(fù)合物。用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)
2.種特異抗原 具有種的特異性,只是某一種沙眼衣原體才具有的特異性抗原,大多數(shù)衣原體的種特異抗原位于主要外膜蛋白(majoroutermembraneprotein, MOMP)上,用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和中和試驗(yàn)檢測(cè),藉此可鑒別不同種衣原體。
3.型特異抗原 為不同型的衣原體所具有的特異性抗原,。型特異性差別的分子基礎(chǔ)是由MOMP氨基酸可變區(qū)的順序變化決定的。常用檢測(cè)的方法是單克隆抗體微量免疫熒光試驗(yàn)。沙眼衣原體可分18個(gè)血清型,沙眼生物亞種分14個(gè)血清型,LGV分4個(gè)血清型。
抵抗力 沙眼衣原體對(duì)熱敏感,在60℃僅能存活5~10min;對(duì)常用消毒劑敏感,用75%乙醇半分鐘或2%來(lái)蘇液5min均可殺死衣原體。但對(duì)低溫抵抗力較強(qiáng),在-70℃可保存數(shù)年,冷凍干燥可保存30年以上仍有活性。對(duì)紅霉素等大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素和四環(huán)素、強(qiáng)力霉素較敏感。
二、致病性與免疫性
致病物質(zhì) 衣原體通過(guò)創(chuàng)面侵入機(jī)體后,原體吸附于易感的柱狀或杯狀粘膜上皮細(xì)胞并在其中繁殖,也能進(jìn)入單核吞噬細(xì)胞繁殖。細(xì)胞質(zhì)圍繞原體內(nèi)陷形成空泡,稱(chēng)吞噬體。原體在空泡內(nèi)發(fā)育成網(wǎng)狀體,完成其繁殖過(guò)程。(細(xì)胞內(nèi)溶酶體如能與吞噬體融合,溶酶體內(nèi)的水解酶則可將衣原體殺滅)。
1、衣原體能產(chǎn)生類(lèi)似革蘭陰性細(xì)菌的內(nèi)毒素毒性物質(zhì),抑制宿主細(xì)胞代謝,直接破壞宿主細(xì)胞。
2、衣原體主要外膜蛋白(MOMP)能阻止吞噬體和溶酶體的融合,從而有利于衣原體在吞噬體內(nèi)繁殖并破壞宿主細(xì)胞;MOMP的表位還能突變,在體內(nèi)可以逃避特異性抗體的中和作用而繼續(xù)感染細(xì)胞;
3、在體內(nèi)抗衣原體的免疫應(yīng)答過(guò)程中,一方面疾病得以緩解,另方面由T細(xì)胞與感染細(xì)胞的相互作用也會(huì)導(dǎo)致免疫病理?yè)p傷,產(chǎn)生第IV型超敏反應(yīng)。
沙眼衣原體不同的生物亞種所致的疾病不一樣,沙眼生物亞種可引起沙眼、包涵體結(jié)膜炎、泌道生殖道感染(男性可合并附睪炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎、盆腔炎等)和肺炎等疾病。而性病淋巴肉芽腫亞種則可引起性病淋巴肉芽腫,鼠亞種則一般不感染人類(lèi)。
沙眼生物亞種:主要寄生在人類(lèi),無(wú)動(dòng)物儲(chǔ)存宿主,包括A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J和K共計(jì)14個(gè)血清型,可引起的疾病有:
1.沙眼 由沙眼亞種A、B、Ba和C血清型所引起。主要通過(guò)眼—眼或眼—手—眼的途徑進(jìn)行直接或間接接觸傳播。沙眼衣原體感染眼結(jié)膜上皮細(xì)胞后,在其中增殖并在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成包涵體,引起局部炎癥。沙眼的早期癥狀是流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生。后期出現(xiàn)纖維組織增生,結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳使角膜受到損害,影響視力或致盲,是目前世界上致盲的第一位病因。
2.包涵體結(jié)膜炎 由沙眼生物亞種B、Ba、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J及K血清型引起。嬰兒及成人都可引起包涵體結(jié)膜炎。嬰兒主要是通過(guò)產(chǎn)道時(shí)而受到感染,通常出生 5-12天后發(fā)病。兩者均可引起濾泡性結(jié)膜炎,其分泌物內(nèi)含大量衣原體,病變類(lèi)似沙眼,但不出現(xiàn)角膜血管翳、不形成結(jié)膜瘢痕等沙眼的后期癥狀,一般經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈。
3.泌道生殖道感染 經(jīng)性接觸傳播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染,其中有50%~60%系沙眼衣原體所致,涉及的血清型與包涵體結(jié)膜炎的相同。衣原體感染是男性尿道炎最常見(jiàn)的病因,未經(jīng)治療者多數(shù)轉(zhuǎn)變成慢性,周期性加重,或可合并附睪炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎、盆腔炎等,增加早產(chǎn)和異位妊娠的機(jī)率。衣原體常與淋病奈瑟菌混合感染、淋病奈瑟菌對(duì)衣原體繁殖起著激活和促進(jìn)作用。因此在合并淋病奈瑟菌感染者,沙眼衣原體分離陽(yáng)性率增高。
4、沙眼衣原體肺炎 由D-K型引起嬰兒沙眼衣原體肺炎。
性病淋巴肉芽腫亞種
人是性病淋巴肉芽腫衣原體的自然宿主,無(wú)動(dòng)物儲(chǔ)存宿主。主要通過(guò)性接觸途徑傳播。由L1、L2、L2a和L3血清型所引起,主要侵犯淋巴組織,在男性侵犯腹股溝淋巴結(jié),引起化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫,常形成瘺管。在女性侵犯會(huì)陰、肛門(mén)和直腸,可形成腸皮膚瘺管;也可引起會(huì)陰-肛門(mén)-直腸狹窄和梗阻。LGV也能引起伴有耳前、頜下及頸部淋巴結(jié)腫大的結(jié)膜炎。
鼠亞種:不感染人類(lèi),主要在小鼠體內(nèi)以潛伏感染的形式存在。
免疫性 機(jī)體感染沙眼衣原體后,體內(nèi)能產(chǎn)生型特異性的細(xì)胞免疫和體液免疫。由MOMP活化的T細(xì)胞可分泌細(xì)胞因子,抑制衣原體包涵體的發(fā)展;特異性中和抗體可以抑制衣原體吸附到宿主細(xì)胞,參與抗衣原體感染的中和作用。但這種免疫力不強(qiáng),因此易造成持續(xù)感染和反復(fù)感染。此外,機(jī)體也可能出現(xiàn)由IV型超敏反應(yīng)造成的免疫病理?yè)p傷現(xiàn)象,如性病淋巴肉芽腫等。
微生物學(xué)檢查法 對(duì)于急性沙眼或包涵體結(jié)膜炎以臨床癥狀即可作出診斷,但對(duì)不能進(jìn)行明確診斷的泌尿生殖道感染,如衣原體性NGU患者,由于臨床癥狀不一定典型,因而實(shí)驗(yàn)室檢查很重要。
標(biāo)本采集:標(biāo)本的準(zhǔn)確采集十分重要,對(duì)沙眼和包涵體結(jié)膜炎患者,如要做實(shí)驗(yàn)室檢查,可取眼結(jié)膜刮片或眼穹窿部及眼結(jié)膜分泌物作涂片。對(duì)泌尿生殖道感染者,可采用泌尿生殖道拭子或?qū)m頸刮片,少數(shù)取精液、前列腺液或其它病灶部分活檢標(biāo)本,也可以用初段尿離心后涂片。若要作衣原體培養(yǎng),應(yīng)注意標(biāo)本的保存并及時(shí)接種到培養(yǎng)細(xì)胞中。采集的標(biāo)本或菌株可加入蔗糖—磷酸鹽—谷氨酸鹽(SPG)培養(yǎng)基,放-70℃冰箱或液氮保存。若標(biāo)本在2h內(nèi)接種,檢出陽(yáng)性率最高;若在24h內(nèi)接種,標(biāo)本可暫時(shí)保存在4℃?zhèn)溆谩?/p>
1.直接涂片鏡檢 采用Giemsa、碘液或熒光抗體染色鏡檢,檢查上皮細(xì)胞內(nèi)有無(wú)包涵體。
2.分離培養(yǎng) 采用感染組織的刮取物或分泌物,接種雞胚卵黃囊或傳代細(xì)胞。衣原體培養(yǎng)較常用的是經(jīng)放線(xiàn)菌酮(抑制細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)快,利于衣原體進(jìn)入細(xì)胞)處理的單層McCoy細(xì)胞,或HeLa-229細(xì)胞及BHK21細(xì)胞,35℃培養(yǎng)48~72h。用直接免疫熒光法或酶聯(lián)免疫法可以檢測(cè)標(biāo)本中的衣原體。
3、抗原檢測(cè) 用ELISA或 直接免疫熒光檢測(cè)屬特異抗原(LPS)或種特異MOMP。
4.核酸檢測(cè) 采用多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)、連接酶鏈反應(yīng)(LCR)等核酸擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)沙眼衣原體,已得到較廣泛應(yīng)用。
防治原則 沙眼的預(yù)防重在注意個(gè)人衛(wèi)生,不使用公共毛巾、浴巾和臉盆,避免直接或間接的接觸傳染,目前尚無(wú)特異的預(yù)防方法。由沙眼衣原體引起的泌尿生殖道感染的預(yù)防應(yīng)廣泛開(kāi)展性病知識(shí)宣傳,提倡健康的性行為,積極治愈病人和帶菌者。治療藥物可選用磺胺、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)(如紅霉素、交沙霉素等)、喹諾同類(lèi)(如諾氟沙星)等。
第二節(jié)、肺炎衣原體
肺炎衣原體是衣原體屬中的一個(gè)新種。只有一個(gè)血清型,即TWAR組衣原體,不同株的外膜蛋白順序分析完全相同。TWAR的命名是根據(jù)最初分離的兩株病原體,即1965年自1名臺(tái)灣小學(xué)生眼結(jié)膜分離的一株衣原體(Taiwan-183,TW-183),和1983年自美國(guó)大學(xué)生急性呼吸道感染者咽部分離的另一株衣原體(acuterespiratory-39,AR-39),因兩株衣原體的抗原性相同,以這兩株的字頭合并后,稱(chēng)作TWAR。
肺炎衣原體在生物學(xué)性狀方面,其原體的結(jié)構(gòu)、DNA序列、培養(yǎng)特性、血清學(xué)分析以及致病性與其他衣原體均有不同:
1.在電鏡下呈梨形,并有清晰的周漿間隙,原體中無(wú)質(zhì)粒DNA。
2、可用HEp-2和HeLa細(xì)胞分離和傳代,但在第一代細(xì)胞內(nèi)很少能形成包涵體。
3.98kDa蛋白為特異性抗原。其單克隆抗體與沙眼衣原體及鸚鵡熱衣原體無(wú)交叉反應(yīng)。
致病性與免疫性 人是肺炎衣原體的唯一宿主,無(wú)動(dòng)物儲(chǔ)存宿主。TWAR感染系人與人之間經(jīng)飛沫或呼吸道分泌物傳播,亦可在家庭或醫(yī)院等集體場(chǎng)所相互傳染。其擴(kuò)散較為緩慢,潛伏期平均30d左右。
TWAR是呼吸道疾病重要的病原體,主要引起青少年急性呼吸道感染,可引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩慢,臨床常表現(xiàn)有咽痛、聲音嘶啞等癥狀,還可引起心包炎、心肌炎和心內(nèi)膜炎。
近年52667788.cn/shiti/來(lái)還發(fā)現(xiàn)TWAR與冠狀動(dòng)脈硬化和心臟病的發(fā)生有關(guān)。 研究證實(shí)在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病灶中存在肺炎支原體。有資料表明慢性肺炎衣原體感染及其形成的免疫復(fù)合物,可能是冠心病發(fā)病的一個(gè)重要因素,但還需要進(jìn)一步研究。
機(jī)體感染肺炎衣原體后,機(jī)體免疫系統(tǒng)可通過(guò)細(xì)胞免疫和體液免疫來(lái)預(yù)防衣原體的再感染,但以細(xì)胞免疫為主,建立的免疫力相對(duì)穩(wěn)定。
微生物學(xué)檢查
1.標(biāo)本采集:因痰液標(biāo)本對(duì)細(xì)胞有毒性,通常取咽拭標(biāo)本或支氣管肺泡灌洗液,標(biāo)本應(yīng)用濾菌器以除去雜菌,不加抗生素。
2、抗原檢測(cè):痰液和咽拭均先涂片,再以ELISA法或直接免疫熒光法檢測(cè)肺炎衣原體的存在。
3、分離培養(yǎng):用HeLa和Hep-2細(xì)胞培養(yǎng)肺炎衣原體較易生長(zhǎng),用McCoy細(xì)胞及其它傳代細(xì)胞分離培養(yǎng)肺炎衣原體較困難,
4.抗體測(cè)定 目前診斷TWAR感染較敏感的方法,是用微量免疫熒光試驗(yàn)分別檢測(cè)TWAR的特異性IgM和IgG抗體,有助于區(qū)別近期感染和既52667788.cn/wsj/往感染,也有利于區(qū)別原發(fā)感染和再感染;凡雙份血清抗體滴度增高4倍或以上;或單份血清IgM抗體滴度≥1:16,或IgG抗體滴度≥1:512,可確定為急性感染。
5.特異性核酸檢測(cè) 采用限切酶PstI對(duì)TWARDNA酶切后,可以獲得一474bp的核酸片段,這是其它兩種衣原體沒(méi)有的DNA片段。采用擴(kuò)增DNA的PCR技術(shù),可以進(jìn)行TWAR特異性核酸片段的檢測(cè)。
第三節(jié) 鸚鵡熱衣原體
鸚鵡熱衣原體是引起噙類(lèi)呼吸道和消化道疾病的病原體,最首先是從鸚鵡體內(nèi)分離出來(lái),可引起人類(lèi)和多種動(dòng)物的感染。鸚鵡熱衣原體能產(chǎn)生一種紅細(xì)胞凝集素,即卵磷脂核蛋白復(fù)合物,能凝集小鼠和雞的紅細(xì)胞,一旦與紅細(xì)胞結(jié)合后,便不能分離下來(lái),特異性抗體和鈣可抑制其凝集作用。
致病性
鸚鵡熱衣原體C.psittaci 的主要宿主是禽類(lèi),所以又稱(chēng)鳥(niǎo)疫 (Ornithosis),因?yàn)樵摬〉膫魅驹床幌抻邴W鵡科鳥(niǎo)類(lèi),而包括家禽和野禽在內(nèi)的諸多鳥(niǎo)類(lèi)。人類(lèi)有無(wú)原發(fā)性的鸚鵡熱感染問(wèn)題,尚在爭(zhēng)論之中。但人類(lèi)的鸚鵡熱作為一種養(yǎng)禽業(yè)的職業(yè)病已被醫(yī)學(xué)界所公認(rèn)。
鳥(niǎo)類(lèi)多為隱性持續(xù)性感染,甚至終生攜帶。當(dāng)鳥(niǎo)長(zhǎng)途飛行導(dǎo)致過(guò)度勞累或營(yíng)養(yǎng)不良等因素使免疫力下降時(shí),可引起發(fā)病或死亡。人類(lèi)在接觸含有鸚鵡熱原體的鳥(niǎo)類(lèi)糞便或呼吸道分泌物后即可獲得感染。潛伏期6~15天之間,個(gè)別病例的潛伏期可長(zhǎng)達(dá)近40天。本病呈急性發(fā)病,患者寒戰(zhàn)、發(fā)熱,體溫38℃左右,咳嗽和胸痛,初發(fā)癥狀很象流感。少數(shù)病例可逐漸發(fā)作,在開(kāi)始1周內(nèi)僅有不同程度的頭痛,頗似普通感冒。隨著病情發(fā)展,患者不安、失眠、嚴(yán)重者出現(xiàn)昏迷。
典型病例臨床表現(xiàn)為非典型性肺炎,出現(xiàn)干咳、少量粘液,有明顯鐵銹色,白細(xì)胞稍低。衣原體毒素引起的毒血癥可使患者惡心、嘔吐、甚至出現(xiàn)黃疸、少尿。嚴(yán)重病例可累及心血管及神經(jīng)系統(tǒng),表現(xiàn)為心肌炎、心內(nèi)膜炎、腦膜炎和腦炎等癥狀,可在心肌炎患者心肌內(nèi)的巨噬細(xì)胞中檢查到包涵體。一般有心臟損害病例同時(shí)有肺炎出現(xiàn),病死率也高。嚴(yán)重感染患者多在發(fā)病2~3周時(shí)死亡。
臨床上根據(jù)癥狀,有鳥(niǎo)糞接觸史即可初步診斷。不過(guò)鑒于臨床病情變化很大,必須有實(shí)驗(yàn)室的輔助以明確診斷。
病原體分離的標(biāo)本可采取患者血液或痰液(痰液宜加鏈霉素處理)。
鸚鵡熱衣原體在雞胚卵黃囊接種,或用HeLa細(xì)胞、猴腎細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),動(dòng)物接種主要是進(jìn)行小鼠腹腔接種,接種動(dòng)物常于7~10天內(nèi)死亡。剖檢后取脾、肺、肝等涂片涂色,查看有無(wú)衣原體及嗜鹼性包涵體。結(jié)果陽(yáng)性時(shí),再進(jìn)行血清學(xué)鑒定?稍诎l(fā)病初期及后期采取雙份血清標(biāo)本進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)其抗體,如后期血清比早期血清抗體滴度高4倍或以上,則有診斷意義。