八、肝細胞膜抗體（Antibody to the hepatocyte membrane, HMA)的檢測
Lee等用Rouin氏液固定的大白鼠肝切片作抗原，作間接免疫熒光（IIF)檢查，在慢性活動性肝炎（CAH)病人血清中成功的發(fā)現(xiàn)了HMA，肝細胞膜呈現(xiàn)黃綠色熒光，12例CAH中11例HMA陽性（93%)10例原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC)全部陽性，20例膠元-血管疾病1例陽性（5%)7例非免疫肝病中1例陽性（14%)，正常人22例中僅1例陽性（5%)。
Bouin氏液固定大白鼠肝冰凍切片和IIF檢查HMA的方法很簡便，特異，對于診斷CAH和PBC，研究病因是很有價值的。
免疫熒光方法：取Wistar大白鼠復(fù)合組織（胃竇、腎皮質(zhì)和髓質(zhì)和肝)用恒冷箱冷凍切片機作冰凍切片，4μm厚，貼于玻片上，在空氣中干燥至少30min。在室溫中用Bouin氏液（75ml飽和苦味酸溶液，24ml甲醛，19ml冰醋酸)固定10min。切片在pH7.40.01mol/L PBS中洗3次，15min，同時攪拌，切片在空氣中干燥后立即應(yīng)用，或存放在-20℃?zhèn)溆谩Ｗ鏖g接免疫熒光染色。
表15-5 平滑肌抗體在不同疾病中的百分率
| 臨床診斷 | 例數(shù) | % |
| SLE | 61 | 9.8 |
| 急性肝炎 | 150 | 26.9 |
| 慢性遷延性肝炎 | 14 | 64.28 |
| 慢性活動性肝炎 | 50 | 80.2 |
| 肝硬化 | 32 | 34.3 |
| 肝黃萎縮 | 4 | (全部陽性) |
| 慢性肝炎 | 154 | 54.2 |
| HBsAg陽性攜帶者 | 12 | 41.7 |
| 甲狀腺機能亢進 | 114 | 18.4 |
| 慢性萎縮性胃炎 | 37 | 13.5 |
| 慢性氣管炎 | 382 | 15.7 |
| 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎 | 12 | 11.1 |
| 皮肌炎 | 11 | 36.4 |
| 肝癌 | 9 | 11.1 |
| 腎小球腎炎 | 18 | 22.0 |
| 心肌炎 | 107 | 18.7 |
| 冠心病 | 247 | 10.1 |
| 糖尿病 | 37 | 27.1 |
| 甲狀腺炎（橋本氏) | 8 | 37.5 |
| 正常對照 | 236 | 9.7 |
九、線粒體抗體（Mitochondrial antibody, AMA)
用人腎（新鮮手術(shù)或尸檢6h以內(nèi))采用腎皮質(zhì)或大白鼠腎臟冰凍切片不需任何固定，作檢查AMA抗體的抗原底物，間接免疫熒光結(jié)果可見遠端腎小管上皮細胞漿呈現(xiàn)均勻的熒光。Walker等（1965)首先用此法在原發(fā)性膽汁性肝硬化，隱原性肝硬化和慢性活動性肝炎中發(fā)現(xiàn)AMA，以原發(fā)性膽汁性肝硬化（158例/188例)陽性率最高（84%)，由于阻塞性肝膽疾病不產(chǎn)生這種抗體，可作鑒別診斷的指標(biāo)。
這種抗體可以是IgG，IgM及IgA，無組織和器官特異性。
Klarskin等（1972)，Walker等（1970，1972)，對于這種抗體的臨床應(yīng)用進一步作了證實。AMA對疾病的發(fā)生的作用尚不明確，有人認為不起作用，有人則認為是造成肝細胞膽小管細胞進行性破壞的自身免疫過程的一個標(biāo)志。而這兩種細胞受累的程度將決定性地導(dǎo)致原發(fā)性膽汁性肝硬化。慢性活動性肝炎和隱原性肝硬化33例中陽性率為60%，233例門脈性肝硬化和332例病毒性肝炎中未查出AMA。Vandell等對106例B型萎縮性胃炎患者檢查AMA全部陰性。我們很少見到AMA陽性的原發(fā)性膽汁性肝硬化病例。
表15-6 AMA亞類及其臨床意義
| AMA亞類 | 臨床意義 |
| 抗M1 | 梅毒 |
| 抗M2 | PBC（原發(fā)性肝硬化)混合型CAH（慢性活動性肝炎)-PBC |
| 抗M3 | 假性紅斑狼瘡綜合征 |
| 抗M4 | 混合CAH-PBC |
| 抗M5 | 原發(fā)性非肝性自身免疫性疾病 |
| 抗M6 | 異煙酰異丙肼所致肝炎 |
由表15-6可以看出，AMA不同亞類所對應(yīng)的抗原存在的差異，其病理意義也各不相同。原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清中主要檢出抗M2型AMA，抗原位于線粒體內(nèi)膜。
