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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 理論教學(xué) > 基礎(chǔ)學(xué)科 > 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) > 正文:病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷
    

病毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢查診斷

  病毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢查包括病毒分離與鑒定、病毒核酸與抗原的直接檢出以及特異性抗體的檢測(cè)。臨床醫(yī)師根據(jù)流行病學(xué)資料,疾病的癥狀與體征綜合判斷可能為何種病毒感染,留取適宜的標(biāo)本送檢。

  一、檢材的采集與送檢

  病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、糞便、腦脊液、皰疹內(nèi)容物、活檢組織或尸檢組織等。

  供分離病毒、檢出核酸及抗原的標(biāo)本的,要求:

 �。ㄒ�)盡早采取在發(fā)病初期(急性期)采取,較易檢出病毒,越遲陽性率越低。

 �。ǘ�)部位適宜由感染部位采取,如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰;腸道感染采取糞便;腦內(nèi)感染采取腦脊液;皮膚感染采取病灶組織;有病毒血癥時(shí)采取血液。

 �。ㄈ�)冷藏速送病毒離活體后在室溫下很易死亡,故采得檢材應(yīng)盡快送檢。若距離實(shí)驗(yàn)室較遠(yuǎn),應(yīng)將檢材放入裝有冰塊或干冰的空器內(nèi)送檢。病變組織則應(yīng)保存于50%的甘油緩沖鹽水中。污染檢材,如鼻咽分泌液、糞便等應(yīng)加入青霉素鏈霉素或慶大毒素等,以免雜菌污染細(xì)胞或雞胚,而影響病毒分離。

  檢測(cè)特異性抗體需要采取急性期與恢復(fù)期雙份血清,第一份盡可能在發(fā)病后立即采取,第二份在發(fā)病后2~3周采取。血清標(biāo)本放4℃-20℃保存,試驗(yàn)前血清標(biāo)本以56℃30分鐘處理去除非特異性物質(zhì)及補(bǔ)體。無菌性腦炎患者也可取腦脊液檢測(cè)特異性lgM。

表23-1 病毒檢材采集與檢驗(yàn)結(jié)果的關(guān)系

采取標(biāo)本的時(shí)期

檢查病毒及其成分

測(cè)定抗體

潛伏期及前驅(qū)期

剛發(fā)病或急性期

恢復(fù)期及康復(fù)期

較難查見

最多查見

很難查見

未增多

未增多或增多不明顯

明顯增多(常超過4倍)

表23-2 供病毒分離的檢材

臨床表現(xiàn)

常見病毒 幫助診斷有用的檢材

呼吸道感染

腺病毒

巨細(xì)胞病毒

流感病毒

副流感病毒

呼腸孤病毒

合胞病毒

咽試、肛拭

咽試或含漱液、尿液

咽拭或含漱液

咽拭含漱液

咽拭、糞便或肛拭

咽拭或含漱液、鼻咽洗液

出疹疾病 柯薩奇病毒

巨細(xì)胞病毒

�?刹《�

EB病毒

單純皰疹病毒

麻疹病毒

風(fēng)疹病毒

水痘帶狀皰疹病毒

糞便或肛拭、咽拭

咽拭或含漱液、尿液

糞便或肛拭、咽拭

咽拭或含漱液

病灶棉拭或吸取液、咽拭

咽拭或含漱液、尿液

咽洗液、鼻咽拭

病灶棉拭或吸取液、咽拭

腦炎 蟲媒病毒

單純皰疹病毒

麻疹病毒

脊髓灰質(zhì)炎病毒

血液、腦脊液

腦活檢、腦脊液、皰疹棉拭或吸取液

腦脊液、咽拭或含漱液、尿液

糞便或肛拭、咽拭、腦脊液

無菌性腦膜炎 柯薩奇病毒

�?刹《�

腮腺炎病毒

腦脊髓液、糞便或肛拭、咽拭

腦脊液、糞便或肛拭、咽拭

腦脊髓液、口頰粘膜棉拭

失天或新生兒感染 巨細(xì)胞病毒

風(fēng)疹病毒

單純皰疹病毒

尿液、咽拭或含漱液

咽拭或含漱液、尿液

病灶棉拭或吸取液、回拭

眼部感染 腺病毒

單純皰疹病毒

結(jié)膜棉拭、咽拭、肛拭

結(jié)膜棉拭、病灶棉拭或吸取液、咽拭

其它感染

巨細(xì)胞包涵體疾病

單核細(xì)胞增多綜合征

心包炎、心肌炎

巨細(xì)胞病毒

巨細(xì)胞病毒

EB病毒

柯薩奇B病毒

�?刹《�

尿液、咽拭

尿液、咽拭

咽拭或洗液

心包液、糞便、咽拭

心包液、糞便、咽拭

  二、病毒的分離與鑒定

  (一)病毒的分離

  病毒分離的一般程序是:

檢驗(yàn)標(biāo)本→殺滅雜菌(青、鏈霉素)→接種 易感的動(dòng)物→出現(xiàn)病狀

雞胚→病變或死亡

細(xì)胞培養(yǎng)→細(xì)胞病變

→鑒定病毒種型(血清學(xué)方法)

  無菌標(biāo)本(腦脊液、血液、血漿、血清)可直接接種細(xì)胞、動(dòng)物、雞胚;無菌組織塊經(jīng)培養(yǎng)液洗液洗滌后制成10~20%懸液離心后,取上清接種;咽洗液、糞便、尿、感染組織或昆蟲等污染標(biāo)本在接種前先用抗生素處理,殺死雜菌。

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