病毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢查包括病毒分離與鑒定、病毒核酸與抗原的直接檢出以及特異性抗體的檢測(cè)。臨床醫(yī)師根據(jù)流行病學(xué)資料,疾病的癥狀與體征綜合判斷可能為何種病毒感染,留取適宜的標(biāo)本送檢。
一、檢材的采集與送檢
病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、糞便、腦脊液、皰疹內(nèi)容物、活檢組織或尸檢組織等。
供分離病毒、檢出核酸及抗原的標(biāo)本的,要求:
�。ㄒ�)盡早采取在發(fā)病初期(急性期)采取,較易檢出病毒,越遲陽性率越低。
�。ǘ�)部位適宜由感染部位采取,如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰;腸道感染采取糞便;腦內(nèi)感染采取腦脊液;皮膚感染采取病灶組織;有病毒血癥時(shí)采取血液。
�。ㄈ�)冷藏速送病毒離活體后在室溫下很易死亡,故采得檢材應(yīng)盡快送檢。若距離實(shí)驗(yàn)室較遠(yuǎn),應(yīng)將檢材放入裝有冰塊或干冰的空器內(nèi)送檢。病變組織則應(yīng)保存于50%的甘油緩沖鹽水中。污染檢材,如鼻咽分泌液、糞便等應(yīng)加入青霉素、鏈霉素或慶大毒素等,以免雜菌污染細(xì)胞或雞胚,而影響病毒分離。
檢測(cè)特異性抗體需要采取急性期與恢復(fù)期雙份血清,第一份盡可能在發(fā)病后立即采取,第二份在發(fā)病后2~3周采取。血清標(biāo)本放4℃-20℃保存,試驗(yàn)前血清標(biāo)本以56℃30分鐘處理去除非特異性物質(zhì)及補(bǔ)體。無菌性腦炎患者也可取腦脊液檢測(cè)特異性lgM。
表23-1 病毒檢材采集與檢驗(yàn)結(jié)果的關(guān)系
采取標(biāo)本的時(shí)期 |
檢查病毒及其成分 |
測(cè)定抗體 |
潛伏期及前驅(qū)期 剛發(fā)病或急性期 恢復(fù)期及康復(fù)期 |
較難查見 最多查見 很難查見 |
未增多
未增多或增多不明顯 明顯增多(常超過4倍) |
表23-2 供病毒分離的檢材
臨床表現(xiàn) |
常見病毒 | 幫助診斷有用的檢材 |
呼吸道感染 |
腺病毒
巨細(xì)胞病毒 流感病毒 副流感病毒 呼腸孤病毒 合胞病毒 |
咽試、肛拭
咽試或含漱液、尿液 咽拭或含漱液 咽拭含漱液 咽拭、糞便或肛拭 咽拭或含漱液、鼻咽洗液 |
出疹疾病 | 柯薩奇病毒
巨細(xì)胞病毒 �?刹《� EB病毒 單純皰疹病毒 麻疹病毒 風(fēng)疹病毒 |
糞便或肛拭、咽拭
咽拭或含漱液、尿液 糞便或肛拭、咽拭 咽拭或含漱液 病灶棉拭或吸取液、咽拭 咽拭或含漱液、尿液 咽洗液、鼻咽拭 病灶棉拭或吸取液、咽拭 |
腦炎 | 蟲媒病毒
單純皰疹病毒 麻疹病毒 脊髓灰質(zhì)炎病毒 |
血液、腦脊液
腦活檢、腦脊液、皰疹棉拭或吸取液 腦脊液、咽拭或含漱液、尿液 糞便或肛拭、咽拭、腦脊液 |
無菌性腦膜炎 | 柯薩奇病毒
�?刹《� 腮腺炎病毒 |
腦脊髓液、糞便或肛拭、咽拭
腦脊液、糞便或肛拭、咽拭 腦脊髓液、口頰粘膜棉拭 |
失天或新生兒感染 | 巨細(xì)胞病毒
風(fēng)疹病毒 單純皰疹病毒 |
尿液、咽拭或含漱液
咽拭或含漱液、尿液 病灶棉拭或吸取液、回拭 |
眼部感染 | 腺病毒
單純皰疹病毒 |
結(jié)膜棉拭、咽拭、肛拭
結(jié)膜棉拭、病灶棉拭或吸取液、咽拭 |
其它感染
巨細(xì)胞包涵體疾病 單核細(xì)胞增多綜合征 |
巨細(xì)胞病毒
巨細(xì)胞病毒 EB病毒 柯薩奇B病毒 �?刹《� |
尿液、咽拭
尿液、咽拭 咽拭或洗液 心包液、糞便、咽拭 心包液、糞便、咽拭 |
二、病毒的分離與鑒定
(一)病毒的分離
病毒分離的一般程序是:
檢驗(yàn)標(biāo)本→殺滅雜菌(青、鏈霉素)→接種 | 易感的動(dòng)物→出現(xiàn)病狀
雞胚→病變或死亡 細(xì)胞培養(yǎng)→細(xì)胞病變 |
→鑒定病毒種型(血清學(xué)方法) |
無菌標(biāo)本(腦脊液、血液、血漿、血清)可直接接種細(xì)胞、動(dòng)物、雞胚;無菌組織塊經(jīng)培養(yǎng)液洗液洗滌后制成10~20%懸液離心后,取上清接種;咽洗液、糞便、尿、感染組織或昆蟲等污染標(biāo)本在接種前先用抗生素處理,殺死雜菌。